NY/T 761.3-2004 无公害食品 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯 和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法
作者： 新闻来源： 点击数： 更新时间：2007-10-8 18:28:00
- 发布时间：2004年1月7日 实施时间：2004年3月1日
发布单位：中华人民共和国农业部
第3部分 蔬菜和水果中氨基甲酸酯类 农药多残留检验方法
1、范围
本部分规定了蔬菜和水果中涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、3－羟基呋喃丹、涕灭威、克白威、甲萘威、异丙威8种氨基甲酸酯类农药多残留液相色谱检测方法。
本部分适用于蔬菜和水果中上述8种农药残留量的检测。
2、原理
样品中氨基甲酸酯类农药用乙腈提取，提取液采用固相萃取技术分离、净化，经浓缩后，使用带荧光检测器和柱后衍生系统的高效液相色谱进行检测。外标法定性、定量。
3、试剂与材料
方法所用试剂，凡未指明规格者，均为分析纯；水为蒸馏水。
3.1 乙腈。
3.2 丙酮，重蒸。
3.3 甲醇，色谱纯。
3.4 氯化钠，140℃烘烤4h。
3.5柱后衍生试剂
3.5.1 0.05mol/L NaOH溶液，Pickering® (cat.No CB130)；
3.5.2 OPA稀释溶液，Pickering® (cat.No CB910)；
3.5.3 邻苯二甲醛(O-Phthaladehyde，OPA)，Pickering® (cat.No 0120)；
3.5.4 巯基乙醇(Thiofluor)，Pickering® (cat.No 3700—2000)。
3.6 固相萃取柱，氨基柱(Aminopropyl®)，容积6mL，填充物500mg。
3.7滤膜，0.2μm，0.45μm。
3.8农药标准品，见表1。
表1 8种氨基甲酸酯类农药标准品
|
序号 |
中文号 |
英文名 |
纯度 |
溶剂 |
| 1 | 涕灭威亚砜 | aldicarb sulfoxide | ≥96％ | 甲醇 |
| 2 | 涕灭威砜 | aldicarb sulfone | ≥96％ | 甲醇 |
| 3 | 灭多威 | methomvl | ≥96％ | 甲醇 |
| 4 | 3-羟基呋喃丹 | 3-hydroxycarbofuran | ≥96％ | 甲醇 |
| 5 | 涕灭威 | aldicarb | ≥96％ | 甲醇 |
| 6 | 克百威 | carbofuran | ≥96％ | 甲醇 |
| 7 | 甲萘威 | carbarVl |
≥96％ | 甲醇 |
| 8 | 异丙威 | isoprocarb | ≥96％ | 甲醇 |
3.9 农药标准溶液配制
单个农药标准溶液：准确称取一定量农药标准晶，用甲醇稀释，逐一配制成1 000mg／L的单一农药标准储备液，贮存在－18℃以下冰箱中。使用时根据各农药在对应检测器上的响应值，吸取适量的标准储备液，用甲醇稀释配制成所需的标准工作液。
农药混合标准溶液：根据务农药在仪器上的响应值，逐一吸取一定体积的单个农药储备液分别注入同一容量瓶中，用甲醇稀释至刻度配制成农药混合标准储备溶液，使用前用甲醇稀释成所需浓度的标准工作液。
4、仪器设备
4.1 食品加工器。
4.2 匀浆机。
4.3 氮吹仪。
4.4 液相色谱仪，可做梯度淋洗，配有柱后衍生反应装置和荧光检测器(FLD)。
5、测定步骤
5.1 试料制备
同第一部分“方法一”。
5.2 提取
同第一部分“方法一”。
5.3 净化
从100mL具塞量筒中准确吸取10.00mL乙腈相溶液，放人150mL烧杯中，将烧杯放在80℃水浴锅上加热，杯内缓缓通人氮气或空气流，将乙腈蒸发近干；加入2.0mL甲醇＋二氯甲烷(1＋99)溶解残渣，盖上铝箔待净化。
将氨基柱用4.0mL甲醇十二氯甲烷(1＋99)预洗条件化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即加
入样品溶液，用15mL离心管收集洗脱液，用2mL甲醇十二氯甲烷(1十99)洗烧杯后过柱，并重复一次。将离心管置于氮吹仪上，水浴温度50℃，氮吹蒸发至近干，用甲醇准确定容至2.5mL。在混合器上混匀后，用0.2um滤膜过滤，待测。
5.4 色谱参考条件
5. 4.1 色谱柱
预柱，C18预柱，4.6mm×4.5cm；分析柱，C18，4.6mm×25cm，5um或C18，4.6mm×25cm，5um。
5.4.2 柱温，42℃。
5.4.3荧光检测器，λex×330nm，λem465nm。
5.4.4 溶剂梯度与流速，见表2
表2 溶剂梯度与流速
|
时间 min |
水 ％ |
甲醇 ％ |
流速 mL/min |
| 0.00 | 85 | 15 | 0.5 |
| 2.00 | 75 | 25 | 0.5 |
| 8.00 | 75 | 25 | 0.5 |
| 9.00 | 60 | 40 | 0.8 |
| 10.00 | 55 | 45 | 0.8 |
| 19.00 | 20 | 80 | 0.8 |
| 25.00 | 20 | 80 | 0.8 |
| 26.00 | 85 | 15 | 0.5 |
5.4.5 柱后衍生
5.4.5.1 0.05mol／L氢氧化钠溶液，流速0.3mL／min；
5.4.5.2 OPA试剂，流速0.3mL／min；
5.45.3 反应器温度
水解温度，100℃；衍生温度，室温。
5.5 色谱分析
吸取20.OμL标准混合溶液(或净化后的样品)注入色谱仪中，以保留时间定性，以样品溶液峰面积与标准溶液峰面积比较定量。
6、结果
6.1 计算
样品中被测农药残留量以质量分数ω计，数值以毫克每千克(mg／kg)表示，按公式(1)计算。
式中：
Ψ——标准溶液中农药的含量，单位为毫克／升(mg／L)；
A——样品中被测农药的峰面积；
As——农药标准溶液中被测农药的峰面积；
V1——提取溶剂总体积；
V2——吸取出用于检测的提取溶液的体积；
V3——样品定容体积；
m——样品的质量。
计算结果保留三位有效数字。
6.2 精密度
将8种氨基甲酸酯类农药混合标准溶液在0.05mg／L、0.10mg／L和0.50mg／L三个水平添加到蔬菜和水果样品中进行方法的精密度试验，方法的添加回收率在70％～120％之间，变异系数小于20％。
7、色谱图
见图1。各农药色谱峰保留时间参考值见附录A。
7、色谱图
见图1。各农药色谱峰保留时间参考值见附录A。
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